elisa法要不要用检测仪器

间接Elisa法主要用于检测抗体。比如我们免疫动物后想要得到检测抗血清的效价，可以用间接Elisa法来测定，elisa是什么检测方法ELISA 检测方法介绍1，ELISA是一种酶联免疫吸附测定法(ELISA。

包被抗原后加入待测抗体，反应后洗板，加入酶标二抗，反应后洗板，加入底物显色。间接Elisa法主要用于检测抗体。比如我们免疫动物后想要得到检测抗血清的效价，可以用间接Elisa法来测定。酶联免疫吸附试验(ELISA)是将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标抗原抗体反应在固相表面进行的技术。

上海恒源生物科技有限公司，这个地方的试剂盒很不错，可以打电话咨询，021。操作步骤1。标准品的稀释:本试剂盒提供一个原始标准品，用户可以根据下图在一个小试管中进行稀释。160U/L5标准，150μl原始标准，150μl标准稀释，80U/L4标准，150μl标准稀释，40U/L3标准稀释，150μl标准稀释，20U/L2标准稀释，150μl标准稀释，10U/将150μl标准物质稀释物加入L1标准物质150μl二号标准物质中。2.加样:设置空白孔(空白对照孔不加样品和酶标试剂，其他步骤相同)、标准孔和待测样品孔。

elisa方法的基本原理:利用抗原与抗体的特异性反应，将分析物与酶连接起来，然后酶与底物反应产生显色反应，进行定量测定。确定的对象可以是抗体或抗原。该方法需要三种试剂:①固相抗原或抗体(免疫吸附剂)；②酶标抗原或抗体(标志物)；③酶作用的底物(显色试剂)。测量时，先将抗原(抗体)与固相载体结合，但仍保留其免疫活性，然后加入抗体(抗原)与酶结合形成的结合物(标记物)，该结合物仍保留其免疫活性。

1。ELISA的原理是将抗原或抗体固定化，用酶标记抗原或抗体。结合到固体载体表面的抗原或抗体仍然保持其免疫活性，并且酶标记的抗原或抗体保持其免疫活性以及其酶活性。在测定过程中，被检测的样品(其中的抗体或抗原)与固体载体表面上的抗原或抗体反应。洗涤在固体载体上形成的抗原或抗体。

底物被酶催化成为有色产物，产物的多少与样品中被测物质的多少有直接关系，因此可以根据颜色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率高，间接放大了免疫反应的结果，使测定方法达到高灵敏度。操作步骤:1。从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需的板条，将未使用的板条和干燥剂放回铝箔袋中压实自封口，密封袋后放回4℃。

ELISA有间接Elisa和直接Elisa两种。其中，直接ELISA分为竞争性ELISA和非竞争性ELISA。其原理是基于抗体与其对应的抗原之间的特异性结合，利用这种结合来确定样本中是否含有特定的抗原。具体如下:1。间接ELISA1。反应过程:首先将检测的抗原加入包被抗原的孔中，然后加入未标记的特异性抗体与之结合，再加入相应标记的二抗与上一步结合。

非竞争性ELISA1。反应过程:首先将待测样品和一定量的酶标抗体(如辣根过氧化物酶标记抗体HRP)加入包被有抗原的孔板中，待测样品会与孔中存在的抗原发生特异性反应，形成抗原抗体复合物。此时，酶标抗体将与复合物反应，剩下的两种未结合状态将被洗去，然后倒入显色原液(如TMB)中加速显色。2.原理:测定样品中特定分子含量的方法。

三明治法三明治法常用于检测大分子抗原。一般操作步骤如下:将特异性抗体包被在塑料孔板中，完成后洗掉多余的抗体，加入到检测对象中。如果测试对象含有待测抗原，它会与塑料孔板上的抗体进行特异性结合，洗掉多余的测试对象，再加一个。与待测抗原结合洗去多余未结合的一抗，加入带酶的二抗，与一抗结合洗去多余未结合的二抗，加入酶底物使酶显色。用肉眼或仪器间接读取显色结果的方法常用于检测抗体。一般操作步骤是:固定已知抗原。

1，ELISA是酶联免疫吸附试验(ELISA)的缩写。它是在免疫酶技术基础上发展起来的一种新的免疫分析技术。2.原理如下:(1)抗原或抗体结合在固体载体表面，并保持其免疫活性。(2)抗原或抗体与酶连接形成酶标记的抗原或抗体，该酶标记的抗原或抗体保留其免疫活性和酶的活性。

通过洗涤将在固体载体上形成的抗原-抗体复合物与其它物质分离，最终结合到固体载体上的酶的量与样品中被检测物质的量成一定比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的多少与样品中被检测物质的多少直接相关，因此可以根据显色反应的深浅进行定性或定量分析，由于酶的催化频率高，反应效应可以被大大放大，从而使测定方法达到高灵敏度。