elisa检测的几种方法,桩基检测有几种方法

elisa是什么检测方法elisa是什么检测方法？elisa是enzymelinkedimmunosorbentassay的缩写。酶联免疫吸附测定法-2几种方法及其原理(1)酶联免疫吸附测定法(enzymelinkedimmunosorbentassay。

ELISA型ELISA可用于确定抗原和抗体。该方法有三个必要的试剂:(1)固相抗生素或抗体，即免疫吸附剂；；(2)酶标记的抗原或抗体称为偶联物；(3)酶反应的底物。根据试剂的来源、标本的情况和检测的具体情况，可以设计各种类型的检测方法。

洗涤以去除未结合的抗体和杂质。2)加入被测样品并保温反应。样本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原-抗体复合物。去除其他未结合的物质。3)加入酶标抗体，保温反应。固体免疫复合物上的抗原与酶标记的抗体结合。彻底清洗未结合的酶标抗体。此时，固体载体上携带的酶的量与样品中抗原的量相关。4)加入底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。用比色法测定样品中抗原的量。

ELISA试剂盒最全的说明书在这里(通用版)规格:96T48T用途:科研实验(仅供实验室研究)保存:28℃。有效期:缀合物1的6个月制备。戊二醛交联法戊二醛是一种双功能试剂，可以通过它将酶与蛋白质的氨基连接起来。碱性磷酸一般用这种方法标记。有两种交联方法:一步法和两步法。一步法将戊二醛直接加入酶和抗体的混合物中，反应后得到酶标抗体。

该方法操作简单、有效、重复性好。缺点是交联反应是随机的，酶和抗体交联时分子间的比例不严格，偶联物大小不均匀，酶和酶，抗体和抗体也可能发生交联，影响效果。两步法中，酶先与戊二醛反应，透析去除多余的戊二醛后，再与抗体反应形成酶标抗体。抗体也可以先与戊二醛反应，再与酶连接。两步法产物中的酶大多以1:1的比例与蛋白质结合，比一步法的酶结合更有助于提高背景和灵敏度，但偶联效率低于一步法。

ELISA的实验原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，不会改变抗体的免疫学特性，也不会影响酶的生物活性。酶标记的抗体可以特异性地结合吸附在固体载体上的抗原或抗体。滴加底物溶液后，底物中所含的供氢体在酶的作用下可由无色的还原型变为有色的氧化型，发生显色反应。因此，是否有相应的免疫反应可以通过底物的显色反应来判断，显色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的多少成正比。

ELISA的实验步骤和注意事项:1。固体载体为聚苯乙烯，对蛋白质有很强的吸附性能，抗体或抗原吸附其上后仍保留原有的免疫活性。PVC:PVC对蛋白质的吸附性能高于聚苯乙烯，但空白值也略高。好的酶标板应该吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，板与板之间，同一板内孔与孔之间性能相近。2.包被①板孔选择:ELISA级微孔板。