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该方法操作简单、有效、重复性好。缺点是交联反应是随机的，酶和抗体交联时分子间的比例不严格，偶联物大小不均匀，酶和酶，抗体和抗体也可能发生交联，影响效果。两步法中，酶先与戊二醛反应，透析去除多余的戊二醛后，再与抗体反应形成酶标抗体。抗体也可以先与戊二醛反应，再与酶连接。两步法产物中的酶大多以1:1的比例与蛋白质结合，比一步法的酶结合更有助于提高背景和灵敏度，但偶联效率低于一步法。

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PVDF膜使用前需要用甲醇浸泡。目前常用的是0.45 PVDF膜。(浩航科贸0531)常用的阻断剂是脱脂奶粉(BD包装)。第二抗体应该与所用的第一抗体具有相同的物种来源，并且通常使用底物化学发光ECL和底物DAB。第一种方法用于相同的水平和实验条件。目前，发表的文章通常是基于底物化学发光ECL。

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ELISA试剂box ELISA (ELISA 试剂 box)(以下简称ELISA(ELISA试剂box))是酶免疫分析中应用最广泛的技术。基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固体载体(聚苯乙烯微反应板)表面，使酶标记的抗原抗体反应在固体表面进行，液相中的游离成分用洗涤的方法洗去。常用的ELISA(酶联免疫吸附试验)方法包括双抗体夹心法和间接法。前者用于检测大分子抗原，后者用于检测特异性抗体。

国产elisa 试剂盒与进口elisa 试剂盒相比，进口elisa 试剂盒更好，但国产elisa 试剂盒也不差。目前有SCI文献引用的厂商。试剂箱，建议使用进口或国内代理。说实话，只是现在测序都交给国内公司了。生化方面试剂，国产的还是不靠谱。为了你的数据，还是导入吧。

常见的ELISA 试剂盒有:1。食品安全检验ELISA 试剂盒是指检测食品中的激素、药物、真菌毒素、过敏原残留、转基因产品试剂盒，以及微生物、维生素等检测产品。包括植物病毒、细菌、真菌、植物激素和转基因作物的农业诊断试剂盒，猪、牛、羊、马等畜禽和宠物的动植物病害诊断试剂盒。

有很多公司生产elisa 试剂盒。但是因为这种产品种类太多，一般客户需求又不是大批量的，一般公司也不生产所有种类，所以只能说有多有少，我们以前用的是上海elisa生物科技有限公司，这是他们的网站。可以去看看，但是网站之类的东西，我个人认为只是参考，主要还是联系客服把事情说清楚，希望能帮到你。